| | Esta página contém uma breve introdução ao seqüenciamento de DNA, que é objetivo principal do pacote Phred-Phrap-Consed.
Os desafios envolvidos nessa tarefa, bem como uma breve descrição sobre esse
pacote de ferramentas é mostrado a seguir.
| Introdução
O seqüênciamento de DNA possui várias etapas distintas (algumas vezes
isoladas), mas com um único objetivo global. Gel Electrophroresis,
Chromatograms, Base Calling, Sequence Assembly, etc. Como mostra a figura
abaixo:
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| Problemas
No entanto, a realização isolada dessas atividades gera alguns
problemas. Dentre eles, os mais relevantes são: (i) perda
de informações; (ii) duplicação de trabalho, para compensar informações
perdidas; (iii) queda de performance; (iv) incompatibilidade de dados;
(v) lentidão no processo;
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| Desafios
Como mencionado acima, o isolamento de algumas atividades gera
diversos problemas, porém, um desafio ainda maior é integrar a cadeia de processos necessária para o
seqüenciamento de DNA. Pela ilustração abaixo, a pergunta básica seria,
como integrar todos esses processos ?
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| Solução: Phred-Phrap-Consed
Coordenado pelo Dr. Phil Green, na Universidade de Washington, em Seattle
desde 1993, este pacote de ferramentas atingiu um enorme sucesso mundial em
projetos acadêmicos e comerciais (mais de 900 projetos e 36 países
utilizam).
O pacote abrange desde a análise em laboratório de um organismo até
a montagem de seus fragmentos de DNA em computador. Ou seja, agora existe
uma integração entre todas as atividades envolvidas no processo de
seqüenciamento, como é mostrado abaixo.
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| Phred-Phrap-Consed
Estas três ferramentas são destinadas a trabalhar em conjunto (mais
precisamente como um pipeline) e explorar os benefícios dessa integração.
Elas podem ser usadas isoladamente, mas os resultados são melhores quando
usadas em conjunto. Pois, por exemplo, o Phred gera dados extras que podem
ser utilizados pelo Phrap, como dados opcionais, para melhorar seu
desempenho. O mesmo comportamento ocorre entre o Phrap e o Consed.
O fluxo de dados das três ferramentanas é mostrado na figura abaixo:
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| Execução Integrada
Como será mostrado nas páginas específicas para cada um dos três
programas, eles são bastante parametrizáveis. Por exemplo, o Phred tem
50 parâmetros e o Phrap tem 53 parâmetros com os quais o usuário
pode operar. No entanto, se os programas forem utilizados em conjunto,
apenas um comando, PhredPhrap, é necessário para executar os programas e
poder visualizar o resultado no Consed.
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